卵巢高钙血症型小细胞癌免疫活性微环境免
2018-12-16 来源：不详 浏览次数：次导读
卵巢高钙血症型小细胞癌（SCCOHT）是由SMARCA4突变驱动的高度侵袭性单基因遗传肿瘤，主要发生于年轻女性。近年来，SCCOHT生物学研究虽取得了进展，但是其有效的治疗手段仍然很少，患者的生存率也很低。然而，免疫检查点抑制剂PD-1抗体在许多肿瘤中表现出了抗肿瘤活性，那么，它是否同样适用于SCCOHT治疗呢？本文将系统阐述应用定量免疫荧光和基因表达谱评估SCCOHTPD-1免疫治疗的反应，并揭示SCCOHT肿瘤的“免疫景观”。
高肿瘤突变负荷，肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）以及肿瘤微环境中PD-L1表达可能会促进PD-1/PD-L1抑制剂的反应。MSI等妇科恶性肿瘤研究表明，突变负荷增加与TIL和肿瘤PD-L1表达增加有关。SCCOHT是一种单基因遗传疾病，因此不存在超突变。截至目前，尚未出现PD-1/PD-L1抑制剂在此类肿瘤中活性的报道，但是最新研究显示，某些SCCOHT患者获益于PD-1治疗。
研究人员收集了4名年龄介于18~29岁患者的病史，每名患者均具有巨大卵巢肿瘤，并接受肿瘤完全切除术；所有患者在1-3年无病生存期后复发；每名患者均曾接受其他手段治疗，然后开始PD-1免疫治疗。其中一名患者获得6个月持续部分缓解，其他三名患者无病生存期持续1.5年以上。本研究所有统计检测均为双侧检验，P值小于0.05被认为具有统计学意义。
尽管无法获得以上四名患者的生物学样本，但是既往调查结果促使研究人员研究了肿瘤微环境，以检验SCCOHT免疫治疗的基本原理。研究人员应用免疫组化（IHC）和免疫荧光（IF）分析，评估了11名SCCOHT患者的肿瘤PD-L1，CD3（T细胞）和CD68（巨噬细胞）表达。结果表明，一名患者除外，其它所有患者均表现出SMARCA4有害突变或缺失（无其他遗传突变），这说明SCCOHT具有低肿瘤突变负荷。
少量体细胞突变的肿瘤中，大多数肿瘤（10例患者）具有PD-L1表达（范围=9-个细胞/HPF）和显著T细胞浸润（范围=3-个细胞/HPF）。另外，大多数肿瘤（10例患者）也表现出CD68+巨噬细胞浸润（范围=10-个细胞/HPF）。与其他实体瘤相似，研究人员在肿瘤细胞和基质细胞中均检测到PD-L1表达，并且三名患者的肿瘤相关巨噬细胞为丰富的PD-L1阳性细胞。
所有患者（低PD-L1阳性患者除外）T细胞浸润和PD-L1表达之间强相关（R2=0.46,P=0.02；皮尔逊积差相关系数）。8名患者PD-L1表达与T细胞浸润显著相关（R2=0.60–0.95,P0.05）。巨噬细胞与T细胞浸润无关，PD-L1表达与肿瘤巨噬细胞浸润弱相关。IHC和IF研究研究表明，巨噬细胞募集和PD-L1表达上调是由不同机制介导的。
PD-L1表达与T细胞浸润之间的关系表明，PD-L1表达可能并非固有的，而是一种对抗TIL的适应性免疫机制，作为对肿瘤微环境中IFNγ产生的回应，PD-L1表达可能上调。患者巨噬细胞和癌细胞中PD-L1表达差异可能暗指细胞间固有的生物学差异或T细胞产生IFNγ的不同反应。
为更详细地表征肿瘤炎症反应及其与PD-L1表达的相关性，研究人员应用NanostringnCounterPanCancer免疫分析面板进行了基因表达谱分析。高PD-L1组中，大多数差异性表达基因（34/36，P＜0.05）升高，并且与T细胞特异性或细胞毒性相关；PDCD1表达较高（差异倍数=0.3；95%CI=1.4-3.8，P=0.03），CD表达也较高，但是后者不具统计学意义，这可能是由于PD-L1阳性细胞的异质性或PD-L1表达转录后调控。
基因表达细胞类型反褶积表明，高PD-L1组更常见所有类型的免疫细胞，这就进一步证实了PD-L1阳性与免疫应答增强之间的相关性。最高评分细胞类型中，所有细胞均具有抗肿瘤活性，如T细胞，Th1，CD8，和细胞毒性细胞。高PD-L1组中，编码CD3，CD3E的两个基因均升高，这说明TIL和PD-L1阳性细胞共存于SCCOHT。研究人员也观察到高PD-L1组中细胞溶解和抗原呈递基因升高。
在统计学上，细胞毒性基因中，穿孔素1（PRF1，倍数变化=3.2,95％CI=2.4-4.5，P0.），颗粒酶B（GZMB；倍数变化=4.3,95％CI=1.7-10.6，P=0.03），颗粒溶素（GNLY；倍数变化=4.6,95%CI=1.8-11.7,P=0.03）和颗粒酶H（GZMH；倍数变化=2.5,95％CI=1.3-4.8，P=0.04）显著增加，这突出了PD-L1表达与细胞毒性细胞活性之间的关联。
KEGG通路分析表明，T细胞受体信号传导通路活性增加，这与研究人员所观察到的“SCCOHT中，TIL参与主动免疫反应”这一结果相符。值得注意的是，高PD-L1病例中，两例的PD-L1主要表达于巨噬细胞，其他两例表达于肿瘤细胞。同样，低PD-L1组中，PD-L1表达主要见于巨噬细胞和肿瘤细胞。高PD-L1或低PD-L1组的亚组之间无明显T细胞相关基因表达差异。
以上数据表明，SCCOHT是免疫原性肿瘤，并且在生物学上，T细胞浸润和PD-L1表达水平显著。SMARCA4是染色质重塑SWI/SNF复合体成员之一，参与多种生物学过程，如转录调控。由SMARCA4调控的转录程序可能影响肿瘤免疫原性，引起TIL浸润和PD-L1上调。由于SCCOHT是一种单基因遗传疾病，所以这种免疫原性可能源于SMARCA4功能丧失。然而，SCCOHT是一种罕见的疾病，因此研究的主要局限性是样本量少。另一局限性是未获得曾接受抗PD-1免疫治疗患者的组织。
这些数据描述了SCCOHT肿瘤的免疫景观和肿瘤微环境，它类似于其它对抗PD-1免疫治疗反应良好的免疫原性肿瘤，这就为SCCOHT患者应用抗PD-1免疫治疗提供了强有力的依据。这些发现强调了突变负荷与免疫原性之间的不一致性，强调了其它生物标志物用于免疫系统识别肿瘤的必要性。
文章编译自：PetarJelinic，JacobRicca，ElkeVanOudenhove，NarcisoOlvera，TahaMerghoub，DouglasALevine，DmitriyZamarin.Immune-ActiveMicroenvironmentinSmallCellCarcinomaoftheOvary,HypercalcemicType:RationaleforImmuneCheckpointBlockade.JNCI.22January.
推荐阅读
1.致癌通路与抗肿瘤免疫反应之间的纠葛
2.双免疫，倍功效丨CheckMate-研究已达主要终点
3.免疫检查点通路VS肿瘤免疫编辑
赞赏
